Описание
Супермикс SuperScript® III First-Strand SuperMix представляет собой оптимизированную рецептуру SuperMix для синтеза первой нити кДНК из очищенной поли (А) + или общей РНК. В этой системе могут быть обнаружены целевые РНК от 100 bp до> 12 kb. Количество исходного материала может варьироваться от 0,1 пг до 5 мкг общей РНК.
Использование SuperMix SuperSix FirstStream Synthesis
В комплект входят SuperScript® III / RNaseOUT ™ Enzyme Mix, 2X First Strand Reaction Mix и Буфер отжига. Реверсивная транскриптаза SuperScript® III, включенная в ферментную смесь, представляет собой версию M-MLV RT, которая была разработана для снижения активности RNase H и обеспечения повышенной термической стабильности. Фермент можно использовать для синтеза кДНК в температурном интервале 45-55 ° С, обеспечивая повышенную специфичность, более высокие выходы кДНК и более полноразмерный продукт, чем другие обратные транскриптазы. Поскольку SuperScript® III RT существенно не ингибируется рибосомной и передающей РНК, его можно использовать для синтеза кДНК из общей РНК. Ингибитор рекомбинантной РНКазы RNaseOUT ™ включен в ферментную смесь для защиты от деградации целевой РНК из-за загрязнения рибонуклеазой. 2Х реакционная смесь первой струей включает 10 мМ MgCl 2и 1 мМ каждого dNTP в буферной композиции, которая была оптимизирована для первичного синтеза кДНК. Буфер отжига используется на начальном этапе отжига шаблона-праймера. Также предусмотрены отдельные трубки олиго (dT) 20 и случайные гексамеры. синтез кДНК может быть осуществлен с использованием либо полной РНК, либо поли (А) + -избранной РНК, заправленной олиго (dT), случайными праймерами или генно-специфическим праймером.
Спецификации
Обратная транскриптаза:
|
SuperScript ™ III
|
Применение в нисходящем направлении:
|
Количественная ПЦР в реальном времени (qPCR), ПЦР обратной транскриптазы (RT-PCR)
|
Формат реакции:
|
SuperMix или Master Mix
|
Оптимальная температура реакции:
|
50 ° C
|
Тип грунтовки:
|
Oligo dT Primers, Random Primers
|
Линия продуктов:
|
SuperScript ™
|
Размер товара:
|
50 реакций
|
Состояние доставки:
|
Сухой лед
|
Содержимое и хранение
Содержит:
• 2X реакционный микс (500 мкл)
• Superzym®® Enzyme Mix (100 мкл)
• Oligo (dT) 20 (всего 50 мкл при 50 мкМ)
• Случайные гексамеры (всего 50 мкл при 50 нг / мкл)
• Буфер для отжига (50 мкл).
Достаточный материал для 50 реакций (по 20 мкл каждый). Хранить при -20 ° C.